بهینه سازی کشت بافت، رویان زایی پیکری و بررسی امکان تولید بذر مصنوعی در گیاه سیب زمینی .solanum tuberosum l

در پژوهش حاضر، نتایج حاصل از کشت جداکشت های مختلف ارقام متفاوت گیاه سیب زمینی solanum tuberosum l. (اگریا و ساوالان) در محیط کشت پایه ms به همراه غلظت ها و نسبت های متفاوتی از هورمون های iba,naa,iaa,2,4-d ,kin, ba بررسی شد. در پژوهش حاضر، نوع جداکشت و جهت کشت جداکشت و دما، شرایط نوری بر میزان کالوس زایی و نوع کالوس زایی تاثیر داشت. هورمون های naa، iba، iaa بر کالوس زایی تاثیری نداشتند و فقط باعث تحریک ریشه زایی شدند. کالوس زایی در حضور هورمون 2,4-d در غلظت های کم (کمتر از 1 میلی گرم در لیتر) باعث ریشه زایی می شد و در غلظت زیاد (بیشتر از 4 میلی گرم در لیتر) میزان کالوس زایی به یکباره روند نزولی پیدا می کرد، مناسب ترین تیمار محیط کشت پایه ms به همراه 3 میلی گرم در لیتر 2,4-d بود. در جداکشت های برگی و میانگره ای حاصل از گیاهچه های یک ماهه رقم های ساوالان و اگریا بیشترین کالوس زایی در محیط کشت پایه ms به همراه 3 میلی گرم در لیتر 2,4-d و 5/0 میلی گرم در لیتر kin می باشد. نوساقه های حاصل از این کالوس ها در محیط کشت پایه ms به همراه 1 میلی گرم در لیتر iba ریشه زایی کردند. در جداکشت های برگی و میانگره ای حاصل از گیاهچه های یک ماهه رقم های ساوالان و اگریا بیشترین کالوس زایی در محیط کشت پایه ms به همراه 3 میلی گرم در لیتر 2,4-d و 5/0 میلی گرم در لیتر ba می باشد. بیشترین ریشه زایی این گیاه در محیط کشت پایه ms به همراه 1 میلی گرم در لیتر iba بود. القای کالوس های گره دار در محیط کشت پایه ms دارای 2 میلی گرم در لیتر 2,4-d و 5/0 میلی گرم در لیتر baانجام شد. که تهیه برش های میکروسکوپی هم وجود ساختارهای رویانی را در ابتدای تکوین و شکل گیری در آنها به اثبات رساند. به منظور آشکار کردن ساختارهای رویانی و تکوین آنها، کالوس های مذکور به محیط کشت پایه ms دارای 4 میلی گرم در لیتر z، 1 میلی گرم در لیتر ,ba 1 میلی گرم در لیتر ga3 انتقال یافتند و رویان های بدست آمده در محیط کشت مذکور در محیط کشت پایه ms به همراه 1 میلی گرم در لیتر iba ریشه زایی کردند. رویان های پیکری برای تولید بذر مصنوعی به محیط محلول ms پایه منتقل شدند و با سدیم آلژینات مخلوط شدند و در یک محلول کلرید کلسیم چکانده شدند. سدیم آلژینات 2 % و کلرید کلسیم 1 % مناسب ترین غلظت برای کپسولی کردن بودند. رویان های پیکری کپسوله شده در مهره های آلژینات کلسیم روی محیط ms فاقد هورمون پس از 6 روز با موفقیت جوانه زدند. گیاهچه های حاصل از رویان های پیکری در شرایط سترون از درون لوله های کشت خارج، و به درون پرلیت سترون منتقل و در شرایط کاملا" مرطوب در زیر پوششهای پلاستیکی نگهداری شد. گیاهچه ها طی مدت یک هفته با سوراخ کردن تدریجی درپوش آنها مرحله سازش را طی کرده و با محیط خشکی سازگار شدند. انتقال گیاهچه ها به گلدانهای دارای خاک معمولی سترون (اتوکلاو شده) انجام شد. گیاهان مرحله رویشی را با موفقیت گذراندند.